Информация, доклады, сообщения

Из материалов Международной научной конференции, посвященной 80-летию ФГУ «ВГНКИ»: изучение свойств изолята вируса Алеутской болезни норок

24.07.2011

К читателям и посетителям сайта

Учитывая научно-практическое значение докладов, опубликованных в сборнике «Лекарственные препараты для животных. Разработка, производство, эффективность и качество» (М.: 2011, - 220 стр. Тезисы докладов Международной научной конференции, посвященной 80-летию Федерального государственного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»), пресс-служба института продолжает публикацию на сайте www.vgnki.ru материалов сборника.

Первые из них (уже опубликованы на  www.vgnki.ru) посвящены сложившимся в 1993 — 2011 гг. системе и основополагающим принципам сертификации лекарственных препаратов, средств воспроизводства животных, кормов и кормовых добавок, а также производству лекарственных средств для применения в ветеринариии и возможности реализации требований ГОСТ 52249-2009 г. Еще можно ознакомиться с биологическими свойствами штамма ERA G333 вируса бешенства. Тема нашей следующей публикации - изучение свойств изолята вируса Алеутской болезни норок.

Мы будем рады, если приведенная на www.vgnki.ru  информация окажется полезной для ветеринаров-практиков, для научных работников и для широкого круга специалистов, работающих как в самой ветеринарии, так и в сопутствующих ей направлениях деятельности. И тем более — польщены, если Вы внесете  www.vgnki.ru в ИЗБРАННОЕ!

 
Изучение свойств изолята вируса Алеутской болезни норок
Н.В. Бондаренко, Л.А. Яковлева, В.Н. Сазонкин, В.И. Уласов (ФГУ «ВГНКИ»)

Алеутская болезнь норок (АБН) повсеместно распространенное вирусное заболевание, наносящее значительный ущерб клеточному звероводству. В специальной литературе описана в основном классическая форма болезни, преимущественно у взрослых норок. В последние годы в ряде звероводческих хозяйствах страны отмечалась массовая гибель щенков цветных норок с признаками интерстициальной пневмонии.

В результате исследования таких животных существующими методами диагностики было доказано, что причиной гибели молодняка норок была але-утская болезнь. Из патологического материала был выделен изолят возбудителя, обозначенный как «Сапфир», результаты изучения свойств которого представлены в настоящем сообщении.

Для выделения возбудителя болезни были использованы различные виды перевиваемых культур, которые заражали специально приготовленной суспензией из органов и тканей павших щенков, предварительно отфильтрованной через фильтры системы Миллипор с диаметром пор 0,22 мкм.

Через трое суток в сформировавшийся клеточный монослой вносили приготовленную суспензию, оставляли на адсорбцию при 320С с последующим удалением вирусной суспензии и внесением поддерживающей среды ДМЕМ. Инфицированные и контрольные матрасы инкубировали при 320С в течение 5 суток с ежедневной микроскопией клеточного монослоя.

         При сравнительном изучении использованных видов перевиваемых культур клеток наиболее подходящей для дальнейшей работы оказалась клеточная линия ССС-81, представляющая собой эмбриональные фибробласты кошки. Через 72 часа в первом пассаже этой культуры клеток наблюдали   морфологические изменения клеток: примерно на 1/3 поверхности монослоя клетки округлились и стали зернистыми. На четвертый день после заражения аналогичные морфологические изменения клеток наблюдались по всей площади монослоя. При этом разрушения клеточного монослоя не отмечалось, измененные клетки находились как бы на поверхности не поврежденных клеток. В последующих двух слепых пассажах после заражения изолятом АБН также отмечали аналогичные изменения клеточного монослоя. В четвертом пассаже наблюдали цитопатические изменения клеточного монослоя. Регистрировали измененияв виде разреженности монослоя, появления большого количества округленных клеток, которые образовывали рисунок в виде цепочек. Идентификацию агента, вызывающего изменения клеточного монослоя на 4 пассаже, проводили с помощью постановки реакции нейтрализации с заведомо положительной сывороткой к штамму П-1 вируса АБН.

При исследовании полученной культуральной расплодки методом негативного контрастирования в электронной микроскопии наблюдали вирионы размером 20-25 нм икосаэдральной формы, типичные для семейства парвовирусов.

При проведении филогенетического анализа установлено, что нуклеотидная последовательность участка VP2 гена образца «Сапфир» по полученным данным наиболее близка штаммам ADV-TR – 97,3% и Utah,Utah-1-   94,1%.

Также следует отметить, что цыплята, зараженные изолятом вируса АБН, через 28 суток дали антительный ответ в РИЭОФ.

Выделенный нами изолят Сапфир вируса АБН будет депонирован в коллекцию микроорганизмов ВГНКИ с целью с целью изучения штаммов вируса, циркулирующих в зверохозяйствах страны.

         На основании проведенных исследований было установлено, что в перевиваемой культуре клеток ССС-81 вирус Алеутской болезни норок вызывает цитопатические изменения клеточного монослоя. Методом ПЦР (тест-система «АБН») подтверждено наличие ДНК вируса АБН в испытуемых образцах. При исследовании методом электронной микроскопии обнаружены вирусные частицы, характерные для АБН.

Исследования по изучению накопления вируса, титрование в культуре клеток, а также патогенность для норок вируса, адаптированного к клеточной культуре, требуют дальнейшего изучения.