Информация, доклады, сообщения

Об отработке условия пробоподготовки и масс-спектрометрического определения b-адреностимуляторов

13.04.2012
Отдел безопасности кормов и пищевых продуктов ФГБУ «ВГНКИ» (заведующий – Комаров А.А., д.б.н., профессор) в рамках проводимой научно-исследовательской работы по теме «Определение остаточных количеств анаболических стероидов, β-адреностимуляторов и тиреостатиков в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием» представил отчет о завершении 1-го этапа исследований, заключающихся в отработке условий пробоподготовки и масс-спектрометрического определения β-адреностимуляторов в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.
 
β-Адреностимуляторы – группа веществ, которые применяются в качестве стимуляторов роста животных. Эти вещества обладают сильным антикатаболическим действием и способствуют увеличению мышечной массы. Другое действие этих препаратов обусловлено значительным жиросжигающим действием, что приводит к получению постного мяса, пользующегося большим спросом на рынке.
 
По химическому строению β-адреностимуляторы можно разделить на три основные группы: анилинового (кленбутерол, бромбутерол, мабутерол, мапентерол, цимбутерол), фенольного (салбутамол, карбутерол, рактопамин) и резорцинового (тербуталин, фенотерол, орципреналин) типа.
В разных странах имели место многочисленные случаи отравления людей мясной продукцией, содержавшей остаточные количества β-адреностимуляторов, сопровождающиеся такими симптомами, как: тахикардия, мышечный тремор, гипокалиемия, тахифилаксия, возбуждение, головные боли, усиленная потливость, сонливость, мышечные спазмы, повышение артериального давления, тошнота. Особую опасность представляет потребление такой продукции людьми с сердечно-сосудистыми заболеваниями.
 
В соответствии с п. 1.5 «Единых санитарно-эпидемиологических и гигиенических требований к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю), утв. Решением комиссии таможенного союза № 299 от 28.05.2010 г. (в редакциях Решений Комиссии Таможенного союза от 17.08.2010 № 341; от 18.11.2010 № 456; от 02.03.2011 № 571; от 07.04.2011 № 622; от 18.10.2011 № 829)»: «При изготовлении продовольственного сырья животного происхождения не допускается использование ветеринарных препаратов (кормовых добавок, стимуляторов роста животных, в том числе гормональных препаратов, ветеринарных лекарственных средств, в том числе антибиотиков)… не допущенных к использованию в соответствии с законодательством государств-членов Таможенного союза». В Российской Федерации β-адреностимуляторы не допущены к использованию в качестве кормовых добавок, стимуляторов роста животных, лекарственных средств.
 
В Российской Федерации разработана арбитражная методика определения остаточных количеств 5 β-адреностимуляторов в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных с помощью газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ГХ-МС) (ГОСТ Р 54032-2010). Недостатками этой методики являются сложная пробоподготовка и необходимость предварительной дериватизации пробы. Также она не позволяет определять β-адреностимуляторы нового поколения, в том числе рактопамин и зилпатерол.
 
Вместо метода ГХ-МС для подтверждающего анализа β-адреностимуляторов в настоящее время используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС). Этот метод является высокочувствительным, специфичным, экспрессным, не требует дериватизации для большинства веществ. За последние несколько лет применение ВЭЖХ-МС/МС для определения β-адреностимуляторов значительно выросло. Были разработаны многокомпонентные методы анализа β-адреностимуляторов в различных матрицах – мясе, печени, почках, моче, крови.
 
Поэтому является актуальным разработка новой подтверждающей методики для определения β-адреностимуляторов с помощью ВЭЖХ-МС/МС вместо существующей.
 
В рамках 1-го этапа исследований по теме «Определение остаточных количеств анаболических стероидов, β-адреностимуляторов и тиреостатиков в кормах, физиологических жидкостях, органах и тканях животных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием» была разработана методика, позволяющая определять 18 β-адреностимуляторов в корме, мясе, печени, почках, сетчатке, моче и шерсти животных методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектирпованием. Детектирование β-адреностимуляторов проводят в режиме мониторинга выбранных реакций (MRM). Предел количественного определения для всех β-адреностимуляторов, за исключением орципреналина, меньше 1 мкг/кг. Из-за матричного эффекта предел количественного определения для орципреналина равен 5 мкг/кг.